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BCA蛋白定量试剂盒短时间即可完成操作!

阅读次数:63    发布时间:2019/7/4 14:24:28

BCA蛋白定量试剂盒短时间即可完成操作!


目前世界上*常用的蛋白浓度检测方法是:BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein AssayKit)和Bradford蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)。BCA 法与传统方法相比,更简单、更稳定、更灵敏度。BCA法测定蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,对于5%以内的SDS、Triton X-100、Tween 20、 Tween 80具有很好的兼容性。BCA法测定蛋白浓度易受螯合剂、高浓度的还原剂影响。在BCA法测定蛋白浓度前应尽量使EDTA浓度≤m10M; DTT浓度≤1mM,2-ME≤0.01%。


规格:250T
保存:室温,避光,
有效期:12个月
用途:总蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA分析
说明:主要由BCA溶液、Cu溶液、BSA标准品组成,在562nm处测吸光值,检测范围在200-1000ug/ml。


操作注意:

1、 蛋白标准(BSA)粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。

2、 待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中,否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致,有可能导致测定不准确。

3、 待测蛋白和蛋白标准加入BCA工作液后,如果发现检测效果不佳,可以室温放置2h或60℃放置30min,颜色会随着时间的延长不断加深。显色反应也会随温度升高而加快。如果浓度较低,可以适当延长孵育时间或在较高温度下孵育。

4、 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质。


二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子,一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。



BCA蛋白定量试剂盒短时间即可完成操作!

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