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一氧化氮(NO)含量检测试剂盒使用手册!

阅读次数:105    发布时间:2019/7/2 10:31:14

一氧化氮(NO)含量检测试剂盒使用手册!


测定意义:

NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
 

测定原理:

NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。


一氧化氮(NO)含量检测试剂盒使用手册!


样品处理:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液)进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心 15min,取上清,置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 15min,取上清置于冰上待测。

3. 体液和培养液等其它液态样品:直接测定。


注意事项:

1. 试剂盒 2-8℃保存。

2. 尽量使用新鲜样品进行检测,试剂三有腐蚀性,操作时请做好防护措施。

3. 若检测出得 OD 值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释,并在计算公式中除以浓缩倍数或者乘以稀释倍数。

4. *检出限为 0.65μmoL/L。


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