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细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)操作简单!

阅读次数:200    发布时间:2019/5/23 10:15:56

细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)操作简单!


自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,*终将吞噬物在溶酶体内降解的过程,自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构,内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物,损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。


单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一种荧光色素,是嗜酸性染色剂,通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂,其检测激发滤光片波长 355nm。阻断滤光片波长 512nm。细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法),适用于培养细胞的自噬染色,又称为 MDC 染色液,可与 EB 合用双染。


规格:100T
保存:—20℃,避光,
有效期:12个月
 
说明:又称MDC染色液,检测细胞自噬


细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)操作简单!






操作方法:

(一)、MDC单独染色:

1、 用去离子水稀释10×Wash buffer至1×。

2、 800g离心5min,收集细胞,用300~400μl的1×Wash buffer清洗细胞1次,弃上清。

3、 加入适量的1×Wash buffer重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。

4、 取适量90μl的细胞悬液至新的EP管中,加入10μl的MDC Stain,轻轻混匀。

5、 室温避光染色15~45min。

6、 800g离心5min,收集细胞,用300~400μl的1×Wash buffer清洗细胞2次,弃上清。

7、 加入100μl的Collection buffer重悬细胞,滴加于载玻片上并加盖玻片。

8、 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长355nm,阻断滤光片波长512nm),计数并拍照。


注意事项:

1、 MDC Stain和EB试剂有一定毒性,请小心操作。

2、 吖啶橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

3、 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。

4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)操作简单!

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