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抗酸染色液操作注意事项!

阅读次数:317    发布时间:2019/4/8 17:41:45

抗酸染色液操作注意事项!

产品简介:

抗酸染色用于细菌标本涂片或菌落涂片的染色。常用于对分枝杆菌属进行初步鉴别。普通细菌染色比较容易着色,而分支杆菌细胞壁含脂质较多,染色比较困难,必须加热才能被Carbolfuchsin solution着色。分枝杆菌菌体着色后,能抵抗盐酸酒精等酸性脱色剂的脱色,而其他细菌和细胞等均被脱色。当再用碱性美蓝复染后,分支杆菌仍为红色,其他细菌与背景呈蓝色。

试剂盒组成:
抗酸染色液A 50ml/100ml/250ml
抗酸染色液B 50ml/100ml/250ml
抗酸染色液C 50ml/100ml/250ml

规格:3×50ml/3×100ml/3×250ml
保存:室温干燥保存,有效期3年。

抗酸染色的原理:

分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。
齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。

操作步骤:

1、 做一适当厚度的涂片,干燥后火焰固定。

2、 滴加抗酸染色液A于玻片上,覆盖住样本,在酒精灯上加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时移开,必要时可续加染色剂以免干涸。加热3-5分钟。

3、 移开火,静置5分钟,待标本冷却后以自来水冲洗。

4、 用抗酸染色液B脱色(大约1分钟)至无红色染液脱出为止。完全脱色可避免产生假阳性结果。

5、 自来水缓慢冲洗后,滴加抗酸染色液C复染约30秒,水洗。

6、 待干后油镜观察。

预期结果:

抗酸菌被染成红色,为抗酸阳性;其它细菌染成蓝色,为抗酸阴性。背景细胞及杂质也被染成蓝色。

注意事项:

1. 染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整。

2。 每次试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发。

3. 本产品有一定的刺激性和腐蚀性,使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。

抗酸染色液操作注意事项!

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