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信帆生物6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶低价促销

阅读次数:28    发布时间:2019/10/31 9:37:32

信帆生物6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶低价促销
信帆生物专业提供6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶,产品质量稳定,价格优惠,确保销售给客户的产品是能够符合质量标准,适合客户要求的产品。本产品低价促销,数量不多,欢迎老师订购咨询!
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6 - phosphogluconate dehydrogenase, 6-PGDH)活性测定试说明书(50T/48S)
测定意义:
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。
测定原理:
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在430 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、低温、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入5 mL试剂一,混匀。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入5 mL试剂一,混匀。
粗酶液提取:
称约0.1g组织,加入1mL试剂一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃离心10min,取上清液,待测。
测定:
1. 分光光度计预热30min以上,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂一置于25℃或者37℃水浴预热30 min以上。
3. 空白管:取1mL石英比色皿,依次加入100μL蒸馏水,100μL试剂二,700μL试剂一,100μL试剂三,于340nm处测定3min内吸光值变化,第0s吸光值记为A1,第180s吸光值记为A2。
4. 测定管:取1mL石英比色皿,依次加入100μL粗酶液,100μL试剂二,700μL试剂一,100μL试剂三,于340nm处测定3min内吸光值变化,第10 s吸光值记为A3,第190s吸光值记为A4。
6PGDH活性计算:
活性单位定义:每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH的酶量为1U(U pr)。
6PGDH酶活性(U prot)
= [(△A测定管-△A空白管)×V反总÷ε÷d×109]÷(Cpr×V样)÷T
= 535.9×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr
△A测定管:A4-A3;△A空白管:A2-A1;ε:NADPH摩尔消光系数,6220;d:比色皿光径,1 cm; V反总:反应体系总体积,0.001 L;Cpr:粗酶液蛋白质浓度,mg/mL,需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;V样:反应体系中加入粗酶液体积,0.1 mL;T:反应时间,3 min。
注意事项:
(1)样品处理等过程均需要在冰上进行,且须在提取当日完成酶活性测定,粗酶液避免反复冻融;
(2)试剂二和试剂三须现配现用,当天未用完试剂保存在4℃,可保存1周。

信帆生物拥有一支在试剂研发、抗体研究、生产及质量管理方面具有丰富经验的高素质人才队伍。环境优美、整洁,从细胞培养、蛋白纯化、疫苗配制到小容量注射剂、分装及全套生产线。检验仪器均采用国内外*设备。*的厂房设施、精良的仪器设备,从而确保了产品的质量和检测的快速、准确、方便,在同行业中一直名列前茅。产品现货供应,欢迎大家订购咨询。
 

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